Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NDH II Double Nickase Plasmid (h): sc-402757-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das NDH II Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- NDH II Double-Nickase-Plasmid (h) und NDH II Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf DHX9 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: NDH II: sc-137232
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
NDH II Double Nickase Plasmid (h) | sc-402757-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NDH II Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402757-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DHX9 kodiert NDH II, eine multifunktionale, ATP-abhängige DExH-Box-Helikase, die an DNA und RNA bindet, um Nukleinsäurestrukturen während der Transkription, der RNA-Prozessierung und der Genomerhaltung umzubauen. NDH II ist an der Überwachung und Auflösung von R-Loops beteiligt, unterstützt das Fortschreiten der Replikationsgabel und ist mit Signalwegen der DNA-Schadensantwort verknüpft, einschließlich Mechanismen, die an homologe Rekombination und Checkpoint-Signalgebung gekoppelt sind. Aufgrund seiner Rollen bei der Koordination von Transkription und RNA-Metabolismus sowie der Aufrechterhaltung der Genomstabilität wird DHX9 häufig in Studien zu Stressantworten und zu einer gestörten Homöostase von RNA–DNA-Hybriden untersucht. Eine veränderte DHX9-Aktivität wurde mit aberranten Spleißprogrammen und Phänotypen chromosomaler Instabilität in Verbindung gebracht, die für mechanistische Forschung in der Krebsbiologie und für genomischen Stress im Zusammenhang mit Neurodegeneration relevant sind.
NDH II Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des DHX9-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von DHX9 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die DHX9-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit DHX9-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.