NCX3 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-431066-NIC

Slc8a3는 마우스 Na⁺/Ca²⁺ 교환체인 NCX3를 암호화하며, NCX3는 Na⁺ 기울기에 Ca²⁺ 유출(또는 특정 전기화학적 조건에서는 Ca²⁺ 유입)을 결합함으로써 세포막에서 세포내 Ca²⁺ 항상성을 유지하는 데 도움을 주는 수송체입니다. NCX3는 세포질 Ca²⁺ 역학을 형성함으로써 흥분–수축 연결, 시냅스 신호전달, 미토콘드리아 Ca²⁺ 처리에 영향을 미치며, 대사, 막 흥분성, 스트레스 반응을 조절하는 더 넓은 칼슘 신호 네트워크와 통합됩니다. NCX3 활성은 빠른 Ca²⁺ 제거가 필요한 신경과 근육 등 흥분성 조직에서 특히 중요합니다. Na⁺/Ca²⁺ 교환의 이상 조절과 Ca²⁺ 과부하 경로는 신경퇴행, 허혈성 손상에 대한 반응, 근병증 관련 세포 기능장애의 기전과 연관되어 있어, Slc8a3는 기전 연구를 위한 유용한 표적이 됩니다.

NCX3 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Slc8a3 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Slc8a3 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Slc8a3의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Slc8a3 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.