Plasmide Double Nickase (h) NAT-8L: sc-415533-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) NAT-8L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NAT-8L Double Nickase (h) et le plasmide NAT-8L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant NAT8L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) NAT-8L | sc-415533-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) NAT-8L | sc-415533-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain NAT8L code la NAT-8L, une N-acétyltransférase qui catalyse la formation de N-acétylaspartate (NAA) à partir de l’aspartate et de l’acétyl-CoA, reliant l’utilisation mitochondriale de l’acétyl-CoA au couplage métabolique entre neurones et cellules gliales. Le NAA est un métabolite cérébral majeur et un précurseur fournissant de l’acétate lors de la synthèse des lipides de la myéline, ce qui place la NAT-8L au carrefour de voies régissant la bioénergétique, le métabolisme lipidique et le soutien des oligodendrocytes. Une homéostasie altérée du NAA constitue un marqueur caractéristique en neuro-imagerie et est fréquemment associée à une atteinte de l’intégrité neuronale ainsi qu’à des processus démyélinisants ou neurodégénératifs. Les variations d’expression ou d’activité de NAT8L ont été étudiées dans le contexte du développement cérébral, des interactions axone–glie et des réponses au stress métabolique pertinentes pour les mécanismes des maladies neurologiques.
NAT-8L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus NAT8L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de NAT8L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de NAT8L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de NAT8L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.