Na+ CP type Xα Lentiviral Activation Particles (h): sc-407011-LAC
- Zielspezies: human
- 200 µl transduktionsfertige, hoch-titer CRISPR/dCas9 Lentivirale Aktivierungs-Partikel
- Na+ CP type Xα Lentiviral Activation Particles (h) sind ein SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) gesteuertes System zur Transkriptionsaktivierung eines gewünschten Zielgens, um wirkungsvoll die spezifische Genexpression mittels lentiviraler Transduktion der Zellen zu erhöhen
- Na+ CP type Xα Lentiviral Activation Particles (h) enthalten die folgenden SAM Aktivierungselemente: deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungs-Domäne VP64, ein MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein und eine zielspezifische 20nt gRNA. Des Weiteren enthalten sind die Resistenzgene für blasticidin, hygromycin und puromycin
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die von Na+ CP type Xα Lentiviral Activation Plasmid (h) und Na+ CP type Xα Lentiviral Activation Plasmid (h2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen des SCN10A-Promotors ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Na+ CP type Xα Lentiviral Activation Particles (h) | sc-407011-LAC | 200 µl | $455.00 |
SCN10A kodiert den spannungsabhängigen Natriumkanal Na+-CP Typ Xα (NaV1.8), eine porenbildende α‑Untereinheit, die einen tetrodotoxinresistenten Natriumeinstrom sowie repetitives Feuern in erregbaren Zellen ermöglicht. Indem dieser Kanal die Initiation und Ausbreitung von Aktionspotenzialen mitprägt, trägt er zu Programmen der Membranerregbarkeit bei, die sich mit nozizeptiver Signalübertragung, neuroimmunem Crosstalk und aktivitätsabhängigen transkriptionellen Antworten überschneiden. Genetische Varianten in SCN10A beim Menschen wurden mit Merkmalen der kardialen Erregungsleitung und einer erhöhten Arrhythmieanfälligkeit in Verbindung gebracht, und eine veränderte NaV1.8‑Aktivität wurde mit der schmerzbezogenen Neurophysiologie und entzündlicher Hypersensitivität assoziiert. Diese Eigenschaften machen SCN10A zu einem nützlichen Ziel für die Untersuchung der Biophysik von Natriumkanälen, erregbarkeitsgetriebener Signalwege sowie von Genotyp‑Phänotyp‑Beziehungen in neuronalen und kardialen Modellsystemen.
Na+ CP type Xα Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SCN10A-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.
Na+ CP type Xα Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SCN10A-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Na+ CP type Xα-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SCN10A-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.
Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.