Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Nanog Double Nickase Plasmid (h): sc-418033-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Nanog Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Nanog Double-Nickase-Plasmid (h) und Nanog Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf NANOG abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Nanog: sc-293121
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Nanog Double Nickase Plasmid (h) | sc-418033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nanog Double Nickase Plasmid (h2) | sc-418033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NANOG kodiert Nanog, einen Homeobox-Transkriptionsfaktor, der für die Aufrechterhaltung der menschlichen Pluripotenz und Selbsterneuerung zentral ist, indem er zusammen mit OCT4/POU5F1 und SOX2 transkriptionelle Netzwerke koordiniert. Nanog beeinflusst Zellschicksalsentscheidungen, indem es den Chromatinzustand und pluripotenzassoziierte Genexpressionsprogramme reguliert und dabei Signaleingänge aus Signalwegen wie TGF-β/SMAD, WNT/β-Catenin und FGF/ERK integriert. Eine fehlregulierte NANOG-Expression ist mit aberranter Differenzierung, epigenetischer Instabilität und stammzellähnlichen Transkriptionszuständen verbunden, wie sie bei Entwicklungsstörungen und unterschiedlichen Krebserkrankungen beobachtet werden. Entsprechend wird NANOG breit als Marker und funktioneller Regulator pluripotenter Stammzellen, der Reprogrammierung und der Tumorzellplastizität untersucht.
Nanog Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des NANOG-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von NANOG abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die NANOG-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit NANOG-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.