NALP1A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-431476

Übersicht

Das murine Gen **Nlrp1a** kodiert **NALP1A**, einen zytosolischen NOD-ähnlichen Rezeptor, der als Inflammasom-Sensor fungiert und die Erkennung von zellulärem Stress mit der angeborenen Immunantwort verknüpft. Nach Aktivierung fördert NALP1A den Zusammenbau von Inflammasom-Komplexen, die zur Aktivierung von Caspase‑1 und zur nachgeschalteten Reifung proinflammatorischer Zytokine wie IL‑1β und IL‑18 führen und so Gefahrenerkennung mit pyroptotischen Zelltodprogrammen koppeln. Dieser Signalweg steht in Wechselwirkung mit dem NF‑κB‑Priming, mitochondrialen Stressantworten und umfassenderen Netzwerken von Mustererkennungsrezeptoren, die Gewebeentzündungen regulieren. Eine fehlregulierte Inflammasom-Signalübertragung wird mit entzündlichen und autoimmunen Phänotypen in Verbindung gebracht und ist im Kontext von Wirt‑Pathogen‑Interaktionen sowie sterilen Entzündungsauslösern intensiv untersucht.

Das NALP1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Nlrp1a-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Nlrp1a-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Nlrp1a nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NALP1A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Nlrp1a-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NALP1A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Nlrp1a-Exone abzielen, die für die NALP1A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Nlrp1a-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NALP1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom NALP1A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Nlrp1a-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NALP1A HDR-Plasmid (m) und NALP1A HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Nlrp1a-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Nlrp1a-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.