NAIP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418189

Descripción general

NAIP (proteína inhibidora de la apoptosis de la familia NLR) es un receptor citosólico humano tipo NOD que contribuye a la detección inmunitaria innata y a la regulación de la supervivencia celular. Participa en procesos relacionados con el inflamasoma al reconocer ligandos bacterianos específicos y favorecer la activación de vías de caspasas inflamatorias, lo que influye en la maduración de citocinas de la familia de la IL‑1 y en las respuestas piroptóticas. A través de estas funciones, NAIP se interrelaciona con la señalización de NF‑κB, los mecanismos de defensa del hospedador frente a patógenos y las respuestas al estrés celular que moldean la homeostasis inflamatoria. La expresión o función desregulada de NAIP se ha asociado con alteraciones en la señalización inflamatoria durante infecciones y patologías mediadas por el sistema inmunitario, lo que lo convierte en un objetivo relevante para estudios mecanísticos de la inflamación y la muerte celular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO NAIP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NAIP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NAIP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NAIP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NAIP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NAIP para la investigación de la señalización de NAIP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NAIP críticos para la función de NAIP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NAIP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido NAIP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NAIP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NAIP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NAIP (h) y el plásmido HDR NAIP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NAIP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NAIP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.