NAIP CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-418189

Übersicht

NAIP (NLR-Familie Apoptose-inhibitorisches Protein) ist ein humaner zytosolischer NOD-ähnlicher Rezeptor, der zur angeborenen Immunerkennung und zur Regulation des Zellüberlebens beiträgt. Es ist an inflammasombezogenen Prozessen beteiligt, indem es spezifische bakterielle Liganden erkennt und die Aktivierung entzündlicher Caspase-Signalwege unterstützt, wodurch die Reifung von Zytokinen der IL‑1-Familie und pyroptotische Antworten beeinflusst werden. Durch diese Funktionen ist NAIP mit der NF‑κB-Signalübertragung, Wirts-Pathogen-Abwehrmechanismen und zellulären Stressantworten verknüpft, die die inflammatorische Homöostase prägen. Eine dysregulierte NAIP-Expression oder -Funktion wurde mit veränderter inflammatorischer Signalübertragung bei Infektionen und immunvermittelten Pathologien in Zusammenhang gebracht, was es zu einem relevanten Ziel für mechanistische Studien zu Entzündung und Zelltod macht.

Das NAIP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NAIP-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NAIP-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NAIP nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NAIP-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NAIP-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NAIP-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NAIP-Exone abzielen, die für die NAIP-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NAIP-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NAIP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom NAIP CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NAIP-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NAIP HDR-Plasmid (h) und NAIP HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NAIP-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NAIP-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.