NaBC1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405950

Übersicht

BCAS1 (brain enriched myelin associated protein 1), auch als NaBC1 bezeichnet, ist ein menschliches Gen, das im zentralen Nervensystem verstärkt exprimiert wird und häufig als Marker für Zellen der Oligodendrozyten-Linie sowie für aktive Myelinisierung verwendet wird. Seine Expression steht in Zusammenhang mit Programmen der Oligodendrozytendifferenzierung und Myelinbildung und verknüpft es mit zellulären Prozessen, die die Isolierung von Axonen und die Reifung der weißen Substanz steuern. Veränderte BCAS1/NaBC1-Expression wurde in Studien zu demyelinisierenden und neurodegenerativen Kontexten beschrieben, was seine Relevanz für die Untersuchung von Mechanismen des Myelinverlusts und der Reparatur unterstreicht. Als linienassoziierter Faktor bietet BCAS1 einen Ansatzpunkt, um transkriptionelle und proteostatische Netzwerke zu analysieren, die Zustandsübergänge von Oligodendrozyten prägen.

Das NaBC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BCAS1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BCAS1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BCAS1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die NaBC1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BCAS1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der NaBC1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BCAS1-Exone abzielen, die für die NaBC1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BCAS1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom NaBC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom NaBC1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BCAS1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das NaBC1 HDR-Plasmid (h) und NaBC1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BCAS1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BCAS1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.