Plasmide Double Nickase (h) MZF-1: sc-403142-NIC

MZF1 (myeloid zinc finger 1) code MZF-1, un facteur de transcription à doigts de zinc C2H2 qui se lie à des éléments régulateurs riches en GC afin de coordonner des programmes d’expression génique impliqués dans la différenciation hématopoïétique, le contrôle du cycle cellulaire et l’engagement de lignée. En modulant des réseaux transcriptionnels qui gouvernent la prolifération, l’apoptose et la maturation myéloïde, MZF-1 peut influencer des processus tels que le maintien des cellules souches/progénitrices et la signalisation en réponse au stress. Une expression ou une activité altérée de MZF1 a été associée à des états transcriptionnels dérégulés observés dans les hémopathies malignes et d’autres cancers, où elle peut affecter l’invasion, la survie ou des signatures géniques liées à la différenciation. En tant que régulateur nucléaire se liant à l’ADN, MZF-1 est fréquemment étudié pour cartographier l’occupation des promoteurs, définir les circuits transcriptionnels et disséquer des fonctions oncogéniques ou suppresseurs de tumeurs dépendantes du contexte.

MZF-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MZF1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MZF1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MZF1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MZF1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.