Myozenin 3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406184

Übersicht

MYOZ3 kodiert Myozenin 3, ein Z‑Scheiben-assoziiertes Protein, das zur sarkomerischen Organisation beiträgt, indem es strukturelle Komponenten mit Signalkomplexen in quergestreifter Muskulatur verbindet. Mitglieder der Myozenin-Familie interagieren mit α‑Actinin sowie Modulatoren der Calcineurin‑NFAT-Signalgebung, was MYOZ3 in Signalwege einbindet, die mechanische Belastung mit transkriptioneller Umprogrammierung und dem Erhalt von Muskelfasern koppeln. Eine Fehlregulation der Z‑Scheiben-Architektur und der calcineurinabhängigen Signalübertragung ist relevant für Untersuchungen zur myofibrillären Integrität, Kontraktilität und zu stressadaptiven Antworten in Skelett- und Herzmuskel. MYOZ3 stellt daher ein nützliches Ziel dar, um das Zusammenspiel zwischen Zytoskelett und Signaltransduktion in der Muskelbiologie und in entsprechenden Krankheitsmodellen zu untersuchen.

Das Myozenin 3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MYOZ3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MYOZ3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MYOZ3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Myozenin 3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MYOZ3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Myozenin 3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MYOZ3-Exone abzielen, die für die Myozenin 3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MYOZ3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Myozenin 3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Myozenin 3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MYOZ3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Myozenin 3 HDR-Plasmid (h) und Myozenin 3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MYOZ3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MYOZ3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.