Plásmido Doble Nickase (h) Myosin Ia: sc-404995-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Myosin Ia consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Myosin Ia (h) y el plásmido de doble nickasa Myosin Ia (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MYO1A. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Myosin Ia | sc-404995-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Myosin Ia | sc-404995-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **MYO1A** codifica la **miosina Ia**, una proteína motora dependiente de actina enriquecida en la superficie apical de las células epiteliales, donde sostiene la arquitectura del borde en cepillo y el acoplamiento entre la membrana y el citoesqueleto. La miosina Ia contribuye a la dinámica de la actina cortical, al tráfico vesicular y a procesos de transporte polarizado que ayudan a mantener la organización de las microvellosidades y la función de barrera del epitelio. A través de sus funciones en la remodelación del citoesqueleto y la regulación de la tensión de membrana, MYO1A es relevante para vías que gobiernan la polaridad celular, la adhesión y la homeostasis epitelial. Las alteraciones en la expresión o función de MYO1A se han asociado con disfunción epitelial y se han estudiado en el contexto de la biología gastrointestinal y de cambios asociados a enfermedad en la diferenciación epitelial.
Myosin Ia El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MYO1A en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MYO1A. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MYO1A. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MYO1A alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.