MYBPHL CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406488

概要

MYBPHL（myosin-binding protein H-like）は、主に横紋筋で発現するサルコメア付随タンパク質の候補をコードしており、ミオシンを含む厚フィラメントに結合して筋原線維の構築に寄与すると考えられています。アクトミオシン収縮装置の構造に影響を与えることで、MYBPHLは心筋細胞および骨格筋細胞におけるサルコメアの組み立て、細胞骨格の安定性、機械刺激伝達（メカノトランスダクション）シグナル伝達などの過程と関連づけられています。心臓リモデリングの文脈ではミオシン結合タンパク質ファミリーの発現パターン変化が報告されており、MYBPHLはストレス応答性の収縮関連経路を研究するための機構的ハブ（要所）として有用であることが示唆されます。MYBPHLの機能解析は、筋原線維関連タンパク質が筋細胞分化や収縮性に関わる遺伝子ネットワークをどのように調節するかの理解に役立ちます。

MYBPHL CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMYBPHL遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MYBPHL内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MYBPHLのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MYBPHLタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MYBPHLシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MYBPHL欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MYBPHLの機能に不可欠なMYBPHLエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MYBPHLゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MYBPHL CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMYBPHL CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MYBPHL遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MYBPHL HDRプラスミド（h）および MYBPHL HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMYBPHLホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMYBPHL標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。