Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Muskelin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-409182
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Muskelin Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Muskelin, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Muskelin Antibody (C-12): sc-398956
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Muskelin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-409182 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
MKLN1 codifica muskelin, una proteina citosolica e associata alle vescicole con funzione di scaffold, implicata nel traffico intracellulare, nell’organizzazione del citoscheletro e nella proteostasi. Muskelin partecipa al trasporto endosomiale e a processi legati all’adesione cellulare, ed è stata associata alla regolazione del turnover di recettori e canali ionici tramite il coordinamento di complessi multiproteici. Influenzando le dinamiche dipendenti dai microtubuli e la localizzazione subcellulare di componenti della segnalazione, MKLN1 può modulare vie che governano morfologia cellulare, migrazione e risposte allo stress. Alterazioni della funzione di MKLN1/muskelin sono state studiate in ambito neurobiologico e in fenotipi associati al cancro, a supporto della sua rilevanza per indagini meccanicistiche sulla segnalazione dipendente dal traffico e sull’omeostasi cellulare.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Muskelin (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MKLN1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MKLN1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MKLN1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Muskelin.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MKLN1 per lo studio della segnalazione di Muskelin, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni MKLN1 critici per la funzione di Muskelin
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MKLN1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Muskelin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Muskelin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MKLN1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Muskelin Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Muskelin (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MKLN1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MKLN1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.