Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MuRF1 Double Nickase Plasmid (m): sc-436648-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MuRF1 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MuRF1 Double-Nickase-Plasmid (m) und MuRF1 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Trim63 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MuRF1: sc-398608
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MuRF1 Double Nickase Plasmid (m) | sc-436648-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MuRF1 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-436648-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das Mausgen **Trim63** kodiert **MuRF1**, eine muskelspezifische RING-Finger-E3-Ubiquitin-Ligase, die die Proteostase reguliert, indem sie myofibrilläre und sarkomerische Proteine für den ubiquitinabhängigen Abbau markiert. MuRF1 wirkt im Ubiquitin–Proteasom-System und ist mit Signalwegen verknüpft, die Muskelumbau, das Zusammenspiel von Autophagie und Proteasom sowie stressresponsive Signalübertragung steuern und dadurch Fasergröße und kontraktile Zusammensetzung prägen. Veränderte **Trim63/MuRF1**-Aktivität wird häufig im Kontext von Skelett- und Herzmuskelatrophie, Reaktionen auf Inaktivität oder Denervierung, kachexieassoziiertem Muskelschwund und kardiomyopathiebedingtem Remodeling untersucht. Als zentraler Regulator des Muskelkatabolismus bietet MuRF1 einen genetisch gut zugänglichen Ansatzpunkt, um transkriptionelle und posttranslationale Programme zu analysieren, die den Erhalt der Muskelmasse steuern.
MuRF1 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Trim63-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Trim63 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Trim63-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Trim63-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.