Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Mucin 5AC/MUC5AC Double Nickase Plasmid (m): sc-421752-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Mucin 5AC/MUC5AC Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Mucin 5AC/MUC5AC Double-Nickase-Plasmid (m) und Mucin 5AC/MUC5AC Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Muc5ac abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Mucin 5AC/MUC5AC: sc-21701
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Mucin 5AC/MUC5AC Double Nickase Plasmid (m) | sc-421752-NIC | 20 µg | $410.00 |
Muc5ac kodiert das gelbildende Muzin Mucin 5AC/MUC5AC, ein stark O-glykosyliertes, sezerniertes Glykoprotein, das einen wichtigen strukturellen Bestandteil der Schleimbarriere der Atemwege und des Gastrointestinaltrakts in Maus-Epithelien darstellt. Seine regulierte Expression unterstützt die mukoziliäre Clearance, die Hydratation des Epithels und die angeborene Abwehr, indem sie die viskoelastischen Eigenschaften des Schleims prägt und den Kontakt von Pathogenen mit der Zelloberfläche begrenzt. Muc5ac wird während der epithelialen Differenzierung und des entzündlichen Remodelings über zytokin- und stressresponsive Programme induziert, darunter EGFR/MAPK-Signalisierung und IL-13–STAT6-vermittelte Becherzell-Metaplasie. Eine fehlregulierte Muc5ac-Produktion und veränderte Muzin-Glykosylierung werden in Modellen respiratorischer Erkrankungen mit Schleimpfropfbildung und chronischer Entzündung sowie in gastrointestinalen Pathologien mit Veränderungen der epithelialen Barriere in Verbindung gebracht, wodurch Muc5ac ein häufig genutzter Readout in Studien zu Atemwegs-Hypersekretion und mukosaler Immunität ist.
Mucin 5AC/MUC5AC Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Muc5ac-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Muc5ac abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Muc5ac-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Muc5ac-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.