Mucin 20 Double Nickase Plasmid (h): sc-415003-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Mucin 20 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Mucin 20 Double-Nickase-Plasmid (h) und Mucin 20 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MUC20 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Mucin 20 Double Nickase Plasmid (h) | sc-415003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mucin 20 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-415003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC20 kodiert für Mucin 20, ein membranassoziiertes Mucin, das an epithelialen Oberflächen exprimiert wird, wo es zur Struktur der Glykokalyx beiträgt und Zell–Zell- sowie Zell–Matrix-Interaktionen moduliert. Mucin 20 wird mit der Regulation der Rezeptor-Tyrosinkinase-Signalübertragung in Verbindung gebracht, einschließlich der Modulation des Outputs des MET/HGF-Signalwegs, wodurch die nachgeschaltete MAPK/ERK- und PI3K/AKT-Signaldynamik beeinflusst wird. Über Effekte auf Adhäsion, Migration und barriereassoziierte Phänotypen ist MUC20 für Studien zur epithelialen Differenzierung und zum Gewebe-Remodeling relevant. Eine veränderte MUC20-Expression wurde in mehreren Krankheitskontexten beschrieben, was seine Nutzung als molekularen Ansatzpunkt zur Untersuchung von Signalweg-Neuverdrahtung und epithelialer Pathobiologie in experimentellen Modellen unterstützt.
Mucin 20 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MUC20-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MUC20 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MUC20-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MUC20-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.