Plasmide Double Nickase (h) Mucin 12/MUC12: sc-400505-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mucin 12/MUC12 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mucin 12/MUC12 Double Nickase (h) et le plasmide Mucin 12/MUC12 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MUC12. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Mucin 12/MUC12 Antibody (B-9): sc-377269
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mucin 12/MUC12 | sc-400505-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Mucin 12/MUC12 | sc-400505-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MUC12 code la mucine 12, une mucine associée à la membrane, enrichie à la surface des épithéliums, dont le domaine extracellulaire fortement O‑glycosylé contribue au glycocalyx protecteur, à l’intégrité de la barrière et aux interactions cellule–cellule. En modulant l’architecture de la membrane apicale et les interactions entre voies de signalisation dépendantes des mucines, MUC12 peut influencer les programmes de différenciation épithéliale, la dynamique d’adhérence et les réponses aux signaux inflammatoires. Les modifications des profils d’expression des mucines, notamment la dérégulation de MUC12, sont fréquemment étudiées dans le contexte du remodelage épithélial, de l’inflammation chronique et de la biologie des maladies gastro‑intestinales. En tant que glycoprotéine de surface présentant d’importantes modifications glycanes, MUC12 est également pertinente pour l’étude des voies de glycosylation et de la manière dont la composition du glycocalyx module l’homéostasie tissulaire.
Mucin 12/MUC12 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MUC12 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MUC12. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MUC12. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MUC12.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.