Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Mts1 Double Nickase Plasmid (h): sc-401774-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Mts1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Mts1 Double-Nickase-Plasmid (h) und Mts1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf S100A4 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Mts1: sc-377059
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Mts1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401774-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mts1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401774-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
S100A4 kodiert das kalziumbindende Protein Mts1, ein Mitglied der S100-Familie, das als zytosolischer und extrazellulärer Regulator der Zellmotilität und der Zytoskelettdynamik wirkt. Mts1 interagiert mit Zielproteinen wie Nichtmuskel-Myosin II und moduliert Prozesse wie Aktin-Remodelling, den Umsatz fokaler Adhäsionen sowie Programme, die einer epithelial-mesenchymalen Transition ähneln. Über kalziumabhängige Signalübertragung und Crosstalk mit Signalwegen, die Migration und Invasion steuern, wird S100A4 häufig im Kontext von Tumorprogression, Fibrose und inflammatorischen Mikroumgebungen untersucht. Eine dysregulierte S100A4-Expression ist außerdem mit Veränderungen der Stromaktivierung und der Trafficking-Dynamik von Immunzellen assoziiert, was es zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Analyse metastaseassoziierter Signalnetzwerke macht.
Mts1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des S100A4-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von S100A4 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die S100A4-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit S100A4-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.