MTMR7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405863

Übersicht

MTMR7 kodiert Myotubularin-Related Protein 7, eine katalytisch aktive Lipidphosphatase, die Phosphatidylinositol-3-phosphat und Phosphatidylinositol-(3,5)-bisphosphat dephosphoryliert und dadurch den phosphoinositidabhängigen Membrantransport feinjustiert. Über die Regulation der Endosomendynamik, des Rezeptor-Recyclings und der Vesikelreifung trägt MTMR7 zur Kontrolle der Signalausgänge von Signalwegen wie EGFR/MAPK und PI3K-assoziierten Netzwerken bei. Eine veränderte MTMR7-Aktivität wurde mit fehlregulierten Phänotypen der Zellproliferation und -migration in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für Studien zur onkogenen Signalübertragung und zur epithelialen Homöostase unterstreicht. Seine Rolle im Phosphoinositid-Umsatz überschneidet sich zudem mit übergeordneten Prozessen wie Autophagie und Lysosomenfunktion, die in krankheitsassoziierten zellulären Zuständen häufig gestört sind.

Das MTMR7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MTMR7-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MTMR7-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MTMR7 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MTMR7-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MTMR7-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MTMR7-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MTMR7-Exone abzielen, die für die MTMR7-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MTMR7-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MTMR7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MTMR7 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MTMR7-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MTMR7 HDR-Plasmid (h) und MTMR7 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MTMR7-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MTMR7-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.