MSY2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405504

Descripción general

YBX2 codifica MSY2, una proteína conservada de unión a ARN/ADN de la familia Y-box que reconoce motivos Y-box y regula la expresión génica posranscripcional mediante la estabilización, el almacenamiento y el control traduccional del ARNm. MSY2 es conocida sobre todo por sus funciones en la biología de las células germinales y la espermatogénesis, donde contribuye al ensamblaje de complejos mRNP y a la sincronización de la síntesis proteica durante la diferenciación meiótica y posmeiótica. En contextos somáticos, las proteínas de la familia Y-box se relacionan con el procesamiento de ARN, los programas de respuesta al estrés y las transiciones de estado celular que influyen en la proliferación y la supervivencia. La expresión desregulada de YBX2 se ha vinculado con una fertilidad masculina reducida y se ha descrito en firmas transcripcionales asociadas a la biología tumoral, lo que respalda su uso como diana mecanística para estudiar vías regulatorias centradas en el ARN.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MSY2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen YBX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del YBX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de YBX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MSY2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en YBX2 para la investigación de la señalización de MSY2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de YBX2 críticos para la función de MSY2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de YBX2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MSY2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MSY2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus YBX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MSY2 (h) y el plásmido HDR MSY2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología YBX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana YBX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.