MSY2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405504

Übersicht

YBX2 kodiert MSY2, ein konserviertes Y-Box-RNA/DNA-bindendes Protein, das Y-Box-Motive erkennt und die posttranskriptionelle Genexpression durch Stabilisierung und Speicherung von mRNA sowie durch Kontrolle der Translation reguliert. MSY2 ist vor allem für seine Funktionen in der Keimbahnbiologie und der Spermatogenese bekannt, wo es zur Assemblierung von mRNPs beiträgt und das Timing der Proteinsynthese während der meiotischen und postmeiotischen Differenzierung mitsteuert. In somatischen Kontexten sind Y-Box-Familienproteine in die RNA-Prozessierung, Stressantwortprogramme und Zellzustandsübergänge eingebunden, die Proliferation und Überleben beeinflussen. Eine dysregulierte YBX2-Expression wurde mit eingeschränkter männlicher Fertilität in Verbindung gebracht und in transkriptionellen Signaturen beschrieben, die mit Tumorbiologie assoziiert sind, was seine Nutzung als mechanistisches Ziel zur Untersuchung RNA-zentrierter Regulationswege unterstützt.

Das MSY2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des YBX2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des YBX2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von YBX2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MSY2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von YBX2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MSY2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf YBX2-Exone abzielen, die für die MSY2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere YBX2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MSY2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MSY2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des YBX2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MSY2 HDR-Plasmid (h) und MSY2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von YBX2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten YBX2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.