Plásmido Doble Nickase (h) MsrA: sc-404424-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MsrA consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MsrA (h) y el plásmido de doble nickasa MsrA (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MSRA. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MsrA Anticuerpo (1C8): sc-59619
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MsrA | sc-404424-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **MSRA** codifica la **metionina sulfóxido reductasa A (MsrA)**, una enzima de reparación citosólica y mitocondrial que reduce la **metionina-S-sulfóxido** de nuevo a **metionina**, revirtiendo el daño oxidativo en las proteínas y ayudando a preservar la **proteostasis**. MsrA funciona dentro de redes de **homeostasis redox** celular que se interconectan con la transferencia de electrones dependiente de **tioredoxina**, el metabolismo mitocondrial y las respuestas antioxidantes al estrés. Al modular el estado de oxidación de los residuos de metionina, **MSRA** puede influir en el plegamiento de proteínas, la actividad enzimática y las vías de señalización sensibles a las especies reactivas de oxígeno. La expresión o actividad alteradas de **MSRA** se han asociado con fenotipos vinculados al estrés oxidativo en la neurodegeneración, la disfunción relacionada con el envejecimiento y el daño tisular inflamatorio, lo que respalda su relevancia en estudios mecanísticos de la biología redox.
MsrA El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MSRA en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MSRA. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MSRA. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MSRA alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.