MRP-S18B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-412012

Übersicht

MRPS18B kodiert das mitochondriale ribosomale Protein S18B (MRP‑S18B), eine Komponente der 28S‑kleinen Untereinheit des Säugetier‑Mitoribosoms, die für die Translation der mitochondrial kodierten Proteine der oxidativen Phosphorylierung (OXPHOS) erforderlich ist. Durch die Unterstützung der Synthese zentraler Untereinheiten der Elektronentransportkette trägt MRP‑S18B zur mitochondrialen respiratorischen Kapazität, zur ATP‑Produktion und zur Redox‑Homöostase bei und ist damit mit Signalwegen verknüpft, die die mitochondriale Proteostase und integrierte Stresssignale steuern. Eine veränderte mitochondriale Translation und ein OXPHOS‑Ungleichgewicht sind wiederkehrende Merkmale bei Erkrankungen energiebedürftiger Gewebe und werden häufig bei mitochondrialen Dysfunktionsphänotypen im Zusammenhang mit Krebs und Neurodegeneration beobachtet. MRPS18B wird daher in Kontexten wie mitochondrialer Biogenese, metabolischer Reprogrammierung und nukleo‑mitochondrialer Koordination untersucht.

Das MRP-S18B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MRPS18B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MRPS18B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MRPS18B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MRP-S18B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MRPS18B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MRP-S18B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MRPS18B-Exone abzielen, die für die MRP-S18B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MRPS18B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MRP-S18B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MRP-S18B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MRPS18B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MRP-S18B HDR-Plasmid (h) und MRP-S18B HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MRPS18B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MRPS18B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.