MRNIP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412131-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRNIPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MRNIP (h) e o Plasmídeo Double Nickase MRNIP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MRNIP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRNIP Anticorpo (H-11): sc-390012
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRNIP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MRNIP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MRNIP (proteína que interage com MRE11-RAD50-NBS1) é um fator nuclear implicado na resposta a danos no DNA por meio de sua associação funcional com o complexo MRN, que coordena a detecção e o processamento de quebras de dupla fita no DNA. Ao modular a sinalização dependente de MRN e a dinâmica de ressecção das extremidades, a MRNIP contribui para a estabilidade do genoma durante o estresse replicativo e influencia a ativação de checkpoints e a escolha da via de reparo. A disrupção de componentes da via MRN está amplamente ligada a fenótipos de instabilidade cromossômica e a uma sensibilidade alterada a estressores genotóxicos, tornando a MRNIP um ponto útil para estudar a organização das redes de reparo de DNA. A pesquisa sobre MRNIP é relevante para mecanismos subjacentes ao acúmulo de mutações, à aneuploidia e a defeitos do ciclo celular observados em diversos contextos de doença.
MRNIP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MRNIP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MRNIP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MRNIP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MRNIP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.