MRGX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437369

Descripción general

MRGX2 (también denominado miembro de la familia MRGPRX2) codifica un receptor acoplado a proteína G relacionado con Mas que participa en la comunicación neuroinmunitaria y en la señalización dependiente del estímulo. En roedores, los receptores tipo MRGX2 se han vinculado a procesos asociados con neuronas sensoriales y mastocitos, acoplándose a vías posteriores que regulan la movilización de calcio intracelular, los programas de desgranulación y la liberación de mediadores inflamatorios. Como GPCR, MRGX2 influye en redes de transducción de señales en la superficie celular que se entrecruzan con la inflamación neurogénica relacionada con el estrés y el dolor, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de prurito, nocicepción y respuestas seudoalérgicas. La actividad desregulada de esta familia de receptores se ha asociado con una reactividad alterada de los mastocitos y fenotipos inflamatorios en modelos preclínicos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MRGX2 (r) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen en líneas celulares rat. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MRGX2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en para la investigación de la señalización de MRGX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de críticos para la función de MRGX2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MRGX2 CRISPR/Cas9 KO (r) y el plásmido MRGX2 CRISPR/Cas9 KO (r2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus . Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MRGX2 (r) y el plásmido HDR MRGX2 (r2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.