Morc3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-404099

Übersicht

MORC3 (Morc3) kodiert eine nukleäre MORC-Familien-ATPase, die mit Chromatin assoziiert und zur ATP-abhängigen Regulation der Genomorganisation beiträgt. Das Protein wird über Interaktionen mit chromatinassoziierten Proteinkomplexen mit der Transkriptionskontrolle, der Aufrechterhaltung von Heterochromatin-Zuständen und Prozessen der DNA-Schadensantwort in Verbindung gebracht. Die MORC3-Aktivität ist mit der Regulation der nukleären Architektur und stressresponsiven Genprogrammen verknüpft und ist damit relevant für Studien zur epigenetischen Stabilität und zur Signalübertragung der angeborenen Immunantwort. Eine fehlregulierte MORC3-Funktion sowie Autoantikörper-Reaktivität wurden in autoimmunen Kontexten beschrieben, was die Untersuchung seiner Rolle bei entzündungsassoziierten zellulären Phänotypen unterstützt.

Das Morc3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MORC3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MORC3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MORC3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Morc3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MORC3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Morc3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MORC3-Exone abzielen, die für die Morc3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MORC3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Morc3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Morc3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MORC3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Morc3 HDR-Plasmid (h) und Morc3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MORC3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MORC3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.