MMP-20 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-405838

Übersicht

MMP20 kodiert die Matrix-Metalloproteinase‑20 (MMP‑20, Enamelysin), eine zinkabhängige Endopeptidase, die auf die Umgestaltung der extrazellulären Matrix spezialisiert ist und während der Schmelzbildung eine ausgeprägte Aktivität zeigt. Durch die Spaltung struktureller Matrixproteine und die Prozessierung von ECM‑Komponenten trägt MMP‑20 zu einer regulierten Proteolyse bei, die die Gewebereifung sowie Mineralisierungsprozesse koordiniert. Seine Aktivität greift in umfassendere, durch Metalloproteinasen regulierte Signalwege ein, die Zell‑Matrix‑Interaktionen, Kaskaden der Proteaseaktivierung und die Dynamik extrazellulärer Signalübertragung prägen. Eine fehlregulierte MMP20‑Funktion ist mit Defekten der Schmelzentwicklung assoziiert und wurde im Kontext proteolysegetriebener Veränderungen von Gewebe‑Mikroumgebungen untersucht, die für die Krankheitsbiologie relevant sind.

Das MMP-20 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MMP20-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MMP20-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MMP20 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MMP-20-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MMP20-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MMP-20-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MMP20-Exone abzielen, die für die MMP-20-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MMP20-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MMP-20 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MMP-20 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MMP20-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MMP-20 HDR-Plasmid (h) und MMP-20 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MMP20-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MMP20-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.