Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MKP-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405872
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MKP-4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MKP-4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MKP-4 Anticuerpo (D-3): sc-137010
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MKP-4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405872 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
DUSP9 codifica la fosfatasa de doble especificidad 9 (MKP-4), una fosfatasa de MAPK que desfosforila residuos de treonina y tirosina en quinasas MAP activadas para atenuar la señalización. MKP-4 participa en el control por retroalimentación negativa de las cascadas ERK y p38, e influye en la proliferación y diferenciación celulares, así como en programas transcripcionales sensibles al estrés. Al limitar la duración y la amplitud de la vía MAPK, DUSP9 contribuye a la regulación de la señalización inflamatoria y de las decisiones de destino celular en múltiples contextos tisulares. La actividad desregulada de DUSP9/MKP-4 se ha asociado con fenotipos de señalización MAPK alterados observados en biología del cáncer, regulación metabólica y modelos de enfermedades inflamatorias, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de vías de señalización.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MKP-4 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DUSP9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DUSP9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DUSP9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MKP-4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DUSP9 para la investigación de la señalización de MKP-4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de DUSP9 críticos para la función de MKP-4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DUSP9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MKP-4 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MKP-4 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DUSP9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MKP-4 (h) y el plásmido HDR MKP-4 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DUSP9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DUSP9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.