Date published: 2025-9-8

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MIAT CRISPR Plasmide (h)

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Datenblätter
  • Zielspezies: human; für das entsprechende mouse Produkt, verwenden Sie bitte MIAT CRISPR Plasmids (m)
  • CRISPR/Cas9 KO Plasmide bestehen ausMIAT-spezifischen 20 nt guide RNA Sequenzen, die aus der GeCKO (v2) Datenbank stammen
  • gRNA Sequenzen leiten die Cas9 Endonuklease spezifisch, um einen gezielten Doppelstrangbruch (DSB) in der genomischen DNA herbeizuführen
  • Gen-spezifische CRISPR Plasmide sowohl für den Knockout als auch für die Aktivierung von Genen sind verfügbar. Detaillierte Produktinformation finden Sie im hier below
  • Alle Produkte werden als transfektions-fertige, aufgereinigte Plasmid DNA angeboten mit Ausnahme der Lentiviralen Aktivierungs Partikel, welche speziell für die Verwendung auf schwer zu transfizierenden Zellen als Lentivirale Partikel verpackt worden sind.

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    Beschreibung

    • 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
    • MIAT CRISPR/Cas9 Knockout (KO) Plasmid (h) besteht aus einem Gemisch aus drei Plasmiden, die jeweils für die Cas9 Nuklease und eine MIAT-spezifische 20 nt guide RNA (gRNA) kodieren, um maximale Knockout Effizienz zu gewährleisten.
    • gRNA Sequenzen wurden aus der GeCKO (v2) Bibliothek abgeleitet. Sie leiten das Cas9 Protein zum entsprechenden Zielgen, wo das Enzym einen spezifischen Doppelstrangbruch (DSB) der genomischen DNA verursacht.
    • Um die Zellen, bei denen ein Doppel-Strang-Bruch (DSB) erfolgreich über Cas9 induziert worden ist, zu selektieren, ist eine Co-Transfektion mit dem MIAT HDR Plasmid (h) (sc-437346-HDR) empfohlen
    • Kontaktieren Sie den Technischen Service bezüglich der Verfügbarkeit von Kontroll-Antikörpern

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    Beschreibung

    • 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
    • MIAT HDR Plasmid (h) ist für die Co-Transfektion mit dem MIAT CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) empfohlen
    • MIAT HDR Plasmid (h) wird als Gemisch bestehend aus zwei bis drei Vektor-Plasmiden geliefert. Die einzelnen Vektor-Plasmide kodieren jeweils für eine zielspezifische Matrize zur homologen Rekombination (HDR) an den entsprechenden Schnittstellen, die erzeugt wurden vom MIAT CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h)
    • Jede HDR Matrize kodiert für zwei 800 bp Homologiearme, welche spezifisch links und rechts an die umliegende genomische DNA des entsprechenden von Cas9-induzierten DNA-Doppelstrangbruchs (DSB) binden.
    • Das HDR Plasmid enthält ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen und ein RFP (rotes Fluoreszenz-Protein) zur visuellen Bestätigung der Transfektion. Puromycin dihydrochlorid (CAS 58-58-2) sc-108071 ist erhältlich als Gebinde zu je 25 mg, 50mg, 250mg oder 1g.
    • Die Gene für Puromycinresistenz und RFP werden von zwei LoxP sites flankiert, die ein weiteres Prozessieren durch den Cre Vector sc-418923 ermöglichen

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    Beschreibung

    • 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
    • Das MIAT Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
    • gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
    • Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
    • Die beiden gRNA-Sequenzen der MIAT Double Nickase Plasmid (h2) unterscheiden sich von den beiden gRNA-Sequenzen der MIAT Double Nickase Plasmid (h)

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    Beschreibung

    • 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
    • MIAT CRISPR Activation Plasmid (h) ist ein Transkriptionsaktivierungs System (SAM) welches für die gezielte Verstärkung der Genexpression bestimmt ist
    • MIAT CRISPR Aktivierungsplasmide (h) bestehen aus 3 Plasmiden im Massenverhältnis 1:1:1: ein Plasmid kodiert für die deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungsdomaine VP64 sowie ein Gen für die Blasticidin Resistenz; ein zweites Plasmid kodierend für das MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein sowie ein Gen für die Hygromycin Resistenz; ein drittes Plasmid kodierd für die Ziel-spezifische 20 nt guide RNA fusioniert an zwei MS2 RNA Aptamere sowie ein Gen für die Puromycin Resistenz.
    • Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.

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    Beschreibung

    • 200 µl virale Stammlösung enthalten 106 infektiöse lentivirale Partikel, diese Menge ist ausreichend für 10-20 Transduktionen
    • Lentivirale Partikel werden als transduktions-fertige, virale Partikel zum Silencing bestimmter Gene in Säugerzellen (Human oder Maus) angeboten.
    • Lentivirale Partikel werden als Pool (=Gemisch), bestehend aus drei bis fünf lentiviralen Vektor-Plasmiden geliefert. Die einzelnen lentiviralen Vector-Plasmide kodieren jeweils für eine zielspezifische 19-25 nt shRNA mit einem 6 bp Loop
    • shRNA Sequenzen entsprechen den MIAT siRNA Gen-Silencer Sequenzen
    • Zellen, die nach der Transduktion die gewünschte shRNA exprimieren, werden über die Zugabe von Puromycin selektiert
    • Biologische Sicherheit - Diese Lentiviralen Partikel sind replikations-inkompetent und so beschaffen, dass sie sich nach der Transduktion und Integration in die genomische DNA der Wirtszelle selbst inaktivieren.
    • Die Lentiviralen Partikel werden nur für den nicht-kommerziellen Einsatz angeboten.

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    Bestellinformation

    ProduktKatalog #EINHEITPreisANZAHLFavoriten

    MIAT CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h)

    sc-437346
    20 µg
    $390.00

    MIAT HDR Plasmid (h)

    sc-437346-HDR
    20 µg
    $437.00

    MIAT Double Nickase Plasmid (h)

    sc-437346-NIC
    20 µg
    $402.00

    MIAT Double Nickase Plasmid (h2)

    sc-437346-NIC-2
    20 µg
    $402.00

    MIAT CRISPR Activation Plasmid (h)

    sc-437346-ACT
    20 µg
    $390.00

    MIAT CRISPR Activation Plasmid (h2)

    sc-437346-ACT-2
    20 µg
    $390.00

    MIAT Lentiviral Activation Particles (h)

    sc-437346-LAC
    200 µl
    $447.00

    MIAT Lentiviral Activation Particles (h2)

    sc-437346-LAC-2
    200 µl
    $447.00