MGST2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-431759

Übersicht

Mikrosomale Glutathion-S-Transferase 2 (MGST2), kodiert durch das Mausgen *Mgst2*, ist ein membranassoziiertes Enzym, das Glutathion an reaktive Lipidzwischenprodukte konjugiert und so die zelluläre Detoxifikation unter oxidativem und entzündlichem Stress unterstützt. MGST2 ist am Eicosanoidstoffwechsel beteiligt, einschließlich der Biosynthese von Leukotrien C4, und ist damit mit Arachidonsäure-getriebenen Signalwegen verknüpft, die den Gefäßtonus, die Thrombozytenfunktion und die Aktivierung von Immunzellen regulieren. Durch die Beeinflussung der Redoxhomöostase und der Produktion von Lipidmediatoren kann MGST2 mitochondriale und ER-Stressantworten, die Membranintegrität sowie proinflammatorische Transkriptionsprogramme mitsteuern. Eine dysregulierte glutathionabhängige Detoxifikation und Leukotriensignalisierung ist für Modelle asthmaähnlicher Entzündung, Atherosklerose und Neuroinflammation relevant, was *Mgst2* zu einem nützlichen Ziel für mechanistische Untersuchungen entzündlicher Lipidnetzwerke macht.

Das MGST2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Mgst2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Mgst2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Mgst2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MGST2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Mgst2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MGST2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Mgst2-Exone abzielen, die für die MGST2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Mgst2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MGST2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom MGST2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Mgst2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MGST2 HDR-Plasmid (m) und MGST2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Mgst2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Mgst2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.