Plasmide Double Nickase (h) MGC13057: sc-413610-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MGC13057 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MGC13057 Double Nickase (h) et le plasmide MGC13057 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C2orf88. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MGC13057 | sc-413610-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) MGC13057 | sc-413610-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C2orf88 code pour la protéine encore peu caractérisée MGC13057, décrite comme un régulateur dépendant du contexte de l’état des cellules épithéliales et des programmes transcriptionnels associés à la différenciation. Les profils d’expression relient C2orf88 à des voies impliquées dans l’adhésion cellulaire, l’organisation du cytosquelette et la signalisation du microenvironnement, ce qui suggère un rôle dans le maintien de l’architecture tissulaire et la modulation de l’expression génique en réponse au stress. Des variations des niveaux de C2orf88 ont été observées dans plusieurs jeux de données tumoraux et dans des contextes inflammatoires, ce qui étaye son utilisation comme gène de type biomarqueur pour étudier les mécanismes reliant la plasticité épithéliale à des phénotypes pertinents pour la maladie. La perturbation fonctionnelle de MGC13057 peut aider à définir les régulateurs en amont et les effecteurs en aval au sein de ces réseaux de remodelage et de différenciation.
MGC13057 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C2orf88 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C2orf88. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C2orf88. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C2orf88.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.