MGAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414091

概要

ヒトのMOGAT1は、モノアシルグリセロールO-アシルトランスフェラーゼ1（MGAT1）をコードしている。MGAT1は小胞体膜に局在する酵素で、モノアシルグリセロールをアシル化してジアシルグリセロール（DAG）を生成する反応を触媒し、トリアシルグリセロール生合成における主要な中間体の形成に関与する。MGAT1は、モノアシルグリセロール、ジアシルグリセロール、および下流の脂質プールのバランスを制御することで、脂肪滴形成や、より広範な細胞内脂質恒常性の維持に寄与する。MGAT1活性の変化は、肝臓での脂質蓄積やインスリンシグナル伝達の破綻などを含む代謝表現型と関連づけられており、肥満に伴う脂肪肝（脂肪変性）や、それに関連する炎症性ストレス経路の文脈で研究されている。これらの機能により、MOGAT1は脂質代謝のリプログラミングや、臓器特異的な中性脂質貯蔵の制御を検討するうえで重要な標的となる。

MGAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMOGAT1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MOGAT1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MOGAT1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MGAT1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MGAT1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MOGAT1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MGAT1の機能に不可欠なMOGAT1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MOGAT1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MGAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMGAT1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MOGAT1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MGAT1 HDRプラスミド（h）および MGAT1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMOGAT1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMOGAT1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。