Plasmide Double Nickase (h) Mex3a: sc-409353-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Mex3a correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Mex3a Double Nickase (h) et le plasmide Mex3a Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MEX3A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Mex3a | sc-409353-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Mex3a | sc-409353-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **MEX3A** code Mex3a, une protéine liant l’ARN contenant des domaines KH et un doigt RING de type C3H1, qui couple la régulation post‑transcriptionnelle à un contrôle des protéines cibles associé à l’ubiquitine. Mex3a influence la stabilité, la localisation et la traduction des ARNm, façonnant ainsi des programmes liés aux décisions de destinée cellulaire, à la prolifération et aux réponses adaptatives au stress. Il a été associé à la régulation de caractéristiques de type « cellules souches » et à l’homéostasie épithéliale, et une expression altérée de MEX3A a été observée dans plusieurs contextes pertinents pour la maladie, notamment au sein de réseaux de signalisation oncogéniques. Par conséquent, MEX3A constitue un nœud utile pour disséquer les circuits de régulation de l’ARN et les voies de protéostasie dans les cellules humaines.
Mex3a Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MEX3A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MEX3A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MEX3A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MEX3A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.