Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
METTL7B Double Nickase Plasmid (h): sc-408340-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das METTL7B Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- METTL7B Double-Nickase-Plasmid (h) und METTL7B Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf METTL7B abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: METTL7B: sc-398626
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
METTL7B Double Nickase Plasmid (h) | sc-408340-NIC | 20 µg | $410.00 |
METTL7B (Methyltransferase-like 7B) kodiert eine mutmaßliche S‑Adenosyl‑L‑methionin‑abhängige Methyltransferase, die überwiegend in endomembranären Kompartimenten lokalisiert ist und der eine Rolle bei der Regulation des lipidassoziierten Stoffwechsels sowie zellulärer Stressantworten zugeschrieben wird. Die Expression von METTL7B wurde mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die die Membranhomöostase, entzündliche Signalübertragung und das Redoxgleichgewicht beeinflussen, was mit einer Assoziation zu metabolischer Umprogrammierung in unterschiedlichen Zelltypen vereinbar ist. Veränderte METTL7B‑Spiegel wurden in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten beobachtet, darunter in der Krebsbiologie und in transkriptionellen Programmen, die mit Neurodegeneration assoziiert sind, wodurch METTL7B einen nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung kontextabhängiger Genregulation darstellt. Die funktionelle Untersuchung von METTL7B unterstützt mechanistische Studien zu methylierungsabhängigen Modifikationen von Proteinen oder kleinen Molekülen und deren nachgelagerten Effekten auf den Zellzustand.
METTL7B Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des METTL7B-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von METTL7B abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die METTL7B-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit METTL7B-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.