Metallothionein 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421733
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Metallothionein 3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Metallothionein 3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Metallothionein 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421733 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mt3 codifica a metalotioneína 3 (MT3), uma proteína rica em cisteína que se liga a metais e regula a disponibilidade intracelular de zinco e cobre, contribuindo para a defesa celular contra o estresse oxidativo e eletrofílico. Ao tamponar metais redox-ativos e modular a sinalização dependente de zinco, a MT3 pode influenciar vias associadas à homeostase de espécies reativas de oxigênio, à proteostase e à função mitocondrial. Em tecidos de camundongo, a expressão de MT3 é proeminente no sistema nervoso, onde tem sido estudada em relação à diferenciação neuronal, à função sináptica e à neurotoxicidade associada a metais. A desregulação do manejo de metais e dos mecanismos de estresse oxidativo envolvendo a MT3 é relevante em modelos de neurodegeneração e de lesão tecidual associada à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Metallothionein 3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mt3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mt3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mt3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Metallothionein 3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mt3 para a investigação da sinalização de Metallothionein 3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mt3 críticos para a função Metallothionein 3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mt3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Metallothionein 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Metallothionein 3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mt3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Metallothionein 3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Metallothionein 3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mt3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mt3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.