MESDC2 Double Nickase Plasmid (h): sc-406189-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MESDC2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MESDC2 Double-Nickase-Plasmid (h) und MESDC2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MESDC2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MESDC2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-406189-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MESDC2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-406189-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MESDC2 (mesoderm development candidate 2) kodiert ein im endoplasmatischen Retikulum (ER) lokalisiertes Chaperon, das mit LRPAP1 zusammenwirkt, um die Faltung, Reifung und den Export aus dem ER von LDL-Rezeptor-verwandten Proteinen zu unterstützen, insbesondere von LRP5 und LRP6. Indem MESDC2 die korrekte Assemblierung und den Transport dieser Wnt-Korezeptoren ermöglicht, beeinflusst es das kanonische Wnt/β-Catenin-Signalweg-Programm sowie nachgeschaltete Prozesse, die Zellschicksalsentscheidungen, Entwicklung und Gewebehomöostase steuern. Eine Störung der MESDC2-Funktion ist daher für die Forschung zur Fehlregulation des Wnt-Signalwegs relevant, unter anderem in Kontexten wie Entwicklungsanomalien und krebsassoziierter Umprogrammierung der Signalübertragung. Seine Rolle in der Qualitätskontrolle von Rezeptoren des sekretorischen Weges macht MESDC2 zudem zu einem hilfreichen Ansatzpunkt für die Untersuchung der ER-Proteostase und der Rezeptorbiogenese.
MESDC2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MESDC2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MESDC2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MESDC2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MESDC2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.