Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MEK-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402363
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MEK-7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MEK-7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MEK-7 Anticorpo (E-7): sc-25288
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MEK-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402363 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MAP2K7 codifica a MEK-7 (MKK7), uma MAP quinase quinase de dupla especificidade que fosforila e ativa seletivamente a JNK (MAPK8/9/10) em resposta a citocinas inflamatórias, stress oxidativo e sinais genotóxicos. A MEK-7 atua na cascata MAPK/JNK para regular programas transcricionais que controlam apoptose, diferenciação, produção de citocinas e remodelação do citoesqueleto. Por meio de crosstalk com MAP3Ks a montante (por exemplo, TAK1/MAP3K7, MEKKs) e com fatores da família AP-1 a jusante, a MAP2K7 ajuda a moldar as respostas de adaptação ao stress e os outputs de sinalização da imunidade inata. A desregulação da sinalização MAP2K7–JNK tem sido associada a respostas inflamatórias alteradas e tem sido investigada em contextos que incluem biologia do cancro, neurodegeneração e modelos de stress metabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MEK-7 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MAP2K7 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MAP2K7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MAP2K7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MEK-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MAP2K7 para a investigação da sinalização de MEK-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MAP2K7 críticos para a função MEK-7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MAP2K7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MEK-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MEK-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MAP2K7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MEK-7 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MEK-7 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MAP2K7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MAP2K7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.