Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) MEK-1: sc-424031-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MEK-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MEK-1 (m) y el plásmido de doble nickasa MEK-1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Map2k1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MEK-1 Anticuerpo (H-8): sc-6250
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MEK-1 | sc-424031-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MEK-1 | sc-424031-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Map2k1 codifica MEK-1, una cinasa de doble especificidad que fosforila y activa ERK1/2 para propagar señales desde RAS y RAF a través de la cascada canónica MAPK/ERK. Esta vía integra señales de factores de crecimiento y citocinas para regular la progresión del ciclo celular, la diferenciación, la supervivencia y programas transcripcionales mediante efectores aguas abajo como ELK1, c-FOS y MYC. La actividad de MEK-1 está modulada por mecanismos de andamiaje y retroalimentación que determinan la amplitud y la duración de la señal, lo que permite un control preciso de procesos del desarrollo y de la homeostasis tisular en modelos murinos. La desregulación de la señalización MAP2K1/MEK-1 se asocia ampliamente con proliferación aberrante y especificación de linaje, lo que la convierte en un nodo central para estudiar la dinámica de la señalización oncogénica, los mecanismos de resistencia y el “cross-talk” entre vías.
MEK-1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Map2k1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Map2k1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Map2k1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Map2k1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.