Partículas Lentivirales de Activación (h) MEF-2C: sc-416594-LAC

MEF2C codifica el factor de transcripción MEF-2C, miembro de la familia MADS-box/MEF2 que integra la señalización dependiente de calcio para regular programas génicos que controlan el destino celular, la diferenciación y la supervivencia. La actividad de MEF-2C está modulada por vías como CaMK/calcineurina y la señalización MAPK, y coopera con reguladores de la cromatina (incluidas las HDAC de clase IIa) para ajustar salidas transcripcionales específicas del contexto. En biología humana, MEF2C es fundamental en redes génicas del neurodesarrollo y del corazón, y su regulación alterada se ha vinculado a fenotipos congénitos del desarrollo y a una especificación de linaje desregulada en modelos celulares relevantes para la enfermedad. Estas características convierten a MEF2C en un nodo ampliamente utilizado para estudiar el control transcripcional, la lógica de los potenciadores (enhancers) y la expresión génica dependiente de la actividad.

Las partículas de activación lentiviral MEF-2C (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de MEF2C en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral MEF-2C (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción MEF2C, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de MEF-2C. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo MEF2C y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.