Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Med22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423222
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Med22 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Med22, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Med22 Anticuerpo (D-10): sc-393738
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Med22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423222 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Med22 codifica una subunidad central del complejo Mediator, un corre regulador transcripcional conservado que conecta factores de transcripción específicos de secuencia con la ARN polimerasa II. En células de ratón, MED22 favorece el ensamblaje y la función del módulo “head” de Mediator, influyendo en la transcripción dependiente del promotor, la dinámica de iniciación y programas más amplios de expresión génica vinculados al desarrollo y la diferenciación. Al coordinar respuestas transcripcionales dependientes de señales, MED22 contribuye a vías que regulan el control del ciclo celular, las respuestas al estrés y la especificación de linaje. La desregulación de componentes de Mediator se ha asociado con una homeostasis transcripcional alterada y fenotipos relevantes para enfermedades, lo que convierte a Med22 en un nodo útil para explorar la vulnerabilidad de las redes transcripcionales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Med22 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Med22 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Med22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Med22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Med22.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Med22 para la investigación de la señalización de Med22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Med22 críticos para la función de Med22
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Med22 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Med22 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Med22 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Med22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Med22 (m) y el plásmido HDR Med22 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Med22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Med22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.