MDR1/ABCB1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400178-LAC

ABCB1 kodiert MDR1/P-Glykoprotein (ABCB1), einen ATP-bindenden Kassetten-(ABC)-Effluxtransporter, der ein breites Spektrum an Xenobiotika und endogenen Metaboliten über die Plasmamembran exportiert. Durch die Regulation der intrazellulären Wirkstoffakkumulation und der zellulären Entgiftung beeinflusst MDR1 die Pharmakokinetik und Barrierefunktionen in Geweben wie Darm, Leber, Niere und an der Blut-Hirn-Schranke. Die ABCB1-Aktivität ist mit Netzwerken der zellulären Stressantwort und des Membrantransports verknüpft, prägt die Exposition gegenüber zytotoxischen Verbindungen und trägt zu Phänotypen der Multidrug-Resistenz bei. Eine fehlregulierte ABCB1-Expression wurde in diversen Tumormodellen mit veränderter Wirkstoffverteilung und Chemoresistenz in Verbindung gebracht und macht ABCB1 zu einem zentralen Ziel in der Transporterbiologie und der Erforschung von Resistenzmechanismen.

MDR1/ABCB1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ABCB1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

MDR1/ABCB1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ABCB1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen MDR1/ABCB1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ABCB1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.