MDR1/ABCB1CRISPR激活质粒(m): sc-422215-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MDR1/ABCB1 CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- MDR1/ABCB1 CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 MDR1/ABCB1 CRISPR 激活质粒 (m) 和 MDR1/ABCB1 CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Abcb1b 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MDR1/ABCB1: sc-55510，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MDR1/ABCB1CRISPR激活质粒(m) | sc-422215-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
MDR1/ABCB1CRISPR激活质粒(m2) | sc-422215-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
小鼠 Abcb1b 基因编码多药耐药转运蛋白 MDR1/ABCB1，这是一种 ATP 结合盒（ABC）外排泵，可限制结构多样的外源性化合物和代谢物在细胞内的积累。MDR1 通过将 ATP 水解与底物外排相偶联，影响药代动力学屏障与细胞解毒程序，从而塑造上皮转运、血–组织屏障功能以及对毒性打击的应激反应等过程。其活性还可通过调控细胞内对信号脂质与环境化学物的暴露程度，与炎症和代谢信号通路发生交叉；因此常在药物处置（体内分布与清除）和多药耐药表型研究中被重点关注。MDR1/ABCB1 表达失调与难治性疾病的模型相关，也常用于体内转运体介导生物利用度机制研究。
MDR1/ABCB1 CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Abcb1b的表达。
MDR1/ABCB1 CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Abcb1b基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Abcb1b转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性MDR1/ABCB1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Abcb1b位点，并能够研究内源性位点上依赖于MDR1/ABCB1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Abcb1b表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟MDR1/ABCB1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。