MDM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400045-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MDM2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MDM2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase MDM2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MDM2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MDM2 Anticorpo (SMP14): sc-965
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MDM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MDM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MDM2 codifica uma ligase E3 de ubiquitina que atua como um regulador negativo central de TP53 ao ubiquitinar a p53 e promover sua exportação nuclear e degradação pelo proteassoma. Por meio desse circuito de retroalimentação, MDM2 molda as respostas celulares ao dano ao DNA e ao estresse oncogênico, influenciando pontos de controle do ciclo celular, apoptose e senescência por meio do programa transcricional da p53. MDM2 também interage com a sinalização RB/E2F e com vias de quinases ativadas por estresse, integrando sinais de fatores de crescimento com a vigilância do genoma. A expressão ou atividade desregulada de MDM2 é frequentemente associada ao controle comprometido da via da p53 e é amplamente estudada no contexto da biologia tumoral, da instabilidade genômica e de mecanismos de resposta a terapias.
MDM2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MDM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MDM2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MDM2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MDM2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.