Plásmido Doble Nickase (h) MCT3: sc-403973-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MCT3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MCT3 (h) y el plásmido de doble nickasa MCT3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SLC16A8. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MCT3 | sc-403973-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MCT3 | sc-403973-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC16A8 codifica el transportador de monocarboxilatos 3 (MCT3), un transportador de solutos acoplado a protones que media el transporte transmembrana de lactato y otros monocarboxilatos, contribuyendo al mantenimiento de la homeostasis del pH celular y al acoplamiento metabólico. En los tejidos oculares humanos, MCT3 se encuentra enriquecido en el epitelio pigmentario de la retina y contribuye al eflujo de lactato desde la retina externa, conectando el flujo glucolítico con el metabolismo oxidativo a través de barreras epiteliales. Como miembro de la familia SLC16, MCT3 actúa dentro de vías más amplias de transporte de monocarboxilatos y regulación ácido-base que influyen en el equilibrio redox y en la señalización metabólica. Las alteraciones en el manejo de monocarboxilatos y el transporte desregulado de lactato se han implicado en la fisiología retiniana y en procesos relevantes para la enfermedad, lo que convierte a SLC16A8 en un objetivo útil para investigar mecanismos de transporte metabólico.
MCT3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SLC16A8 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SLC16A8. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SLC16A8. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SLC16A8 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.