MCM3AP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406369
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MCM3AP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MCM3AP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MCM3AP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406369 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MCM3AP (proteína associada ao MCM3) é um fator nuclear multifuncional que interage com o complexo helicase MCM2–7 e contribui para a regulação da replicação do DNA e da progressão do ciclo celular. Tem sido associada a processos que coordenam o licenciamento da replicação com o controlo transcricional e o metabolismo de RNA, refletindo funções na manutenção do genoma e na capacidade proliferativa. A perturbação ou a expressão alterada de MCM3AP tem sido investigada no contexto de stress replicativo, sinalização associada à cromatina e respostas celulares a danos no DNA que influenciam a estabilidade genómica. Estes mecanismos são frequentemente estudados em biologia do cancro e noutras doenças proliferativas, em que conflitos entre replicação e transcrição e disfunção de checkpoints são temas de investigação proeminentes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MCM3AP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MCM3AP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MCM3AP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MCM3AP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MCM3AP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MCM3AP para a investigação da sinalização de MCM3AP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MCM3AP críticos para a função MCM3AP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MCM3AP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MCM3AP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MCM3AP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MCM3AP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MCM3AP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MCM3AP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MCM3AP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MCM3AP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.