Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MBNL2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401921-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MBNL2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MBNL2 Double-Nickase-Plasmid (h) und MBNL2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MBNL2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MBNL2: sc-136167
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MBNL2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401921-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MBNL2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401921-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBNL2 (Muscleblind-like Splicing Regulator 2) ist ein RNA-bindendes Protein, das YGCY-Motive erkennt, um alternatives Spleißen, mRNA-Lokalisierung und -Stabilität im Verlauf der Entwicklung und der Gewebedifferenzierung zu steuern. Im Zellkern koordiniert es die Auswahl von Spleißstellen und trägt zu RNA-Verarbeitungsnetzwerken bei, die die Organisation des Zytoskeletts, den Zellzyklusverlauf und stressadaptive Transkriptprogramme prägen. MBNL2 wird häufig im Kontext von RNA-Repeat-assoziierter Toxizität und Spliceopathie-Mechanismen untersucht, bei denen Störungen der MBNL-Familienaktivität zu weitreichendem Fehl-Spleißen führen. Eine dysregulierte, MBNL2-abhängige Spleißregulation wurde mit neuromuskulären und neurodegenerativen Krankheitsmodellen in Verbindung gebracht, was MBNL2 zu einem wichtigen Ziel für die Aufklärung von RNA-Verarbeitungswegen macht.
MBNL2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MBNL2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MBNL2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MBNL2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MBNL2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.