Matrilin-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404852

Descripción general

MATN2 codifica la matrilina-2, una glucoproteína adaptadora multidominio de la matriz extracelular (MEC) que participa en el ensamblaje y la estabilización de redes filamentosas al actuar como puente entre colágenos, proteoglicanos y otros componentes de la matriz. La matrilina-2 contribuye a la arquitectura tisular y a la comunicación célula–matriz que influyen en la adhesión, la migración y la mecanotransducción, procesos estrechamente vinculados a los programas de remodelación de la MEC. Por su papel en la organización de la matriz, MATN2 es relevante para estudios de biología musculoesquelética y del tejido conectivo, así como en contextos más amplios en los que la composición de la MEC modula la inflamación y la reparación de heridas. La alteración de la homeostasis de la MEC en la que participa MATN2 se ha asociado con remodelación patológica y fenotipos similares a la fibrosis en múltiples tejidos, lo que impulsa la investigación mecanística en modelos celulares humanos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Matrilin-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MATN2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MATN2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MATN2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Matrilin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MATN2 para la investigación de la señalización de Matrilin-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MATN2 críticos para la función de Matrilin-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MATN2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Matrilin-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Matrilin-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MATN2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Matrilin-2 (h) y el plásmido HDR Matrilin-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MATN2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MATN2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.