Plasmide Double Nickase (m) MAPKAPK-2: sc-421557-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MAPKAPK-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MAPKAPK-2 Double Nickase (m) et le plasmide MAPKAPK-2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mapkapk2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MAPKAPK-2 Antibody (A-11): sc-393609
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MAPKAPK-2 | sc-421557-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Mapkapk2** code la **MAPKAPK-2 (MK2)**, une kinase sérine/thréonine qui agit comme un effecteur clé en aval de la voie de réponse au stress **p38 MAPK**. MK2 phosphoryle des substrats tels que **HSPB1/Hsp27** et régule des protéines liant l’ARN qui contrôlent la stabilité et la traduction des ARNm de cytokines inflammatoires, reliant ainsi la signalisation de stress à la régulation génique post‑transcriptionnelle. Par ces fonctions, elle coordonne des réponses cellulaires incluant l’inflammation, la signalisation de l’immunité innée, l’apoptose, les points de contrôle du cycle cellulaire et le remodelage du cytosquelette. Une activité de MK2 dérégulée a été impliquée dans des phénotypes inflammatoires et auto-immuns, des réponses au stress métabolique, la neuroinflammation et des réseaux de signalisation associés aux tumeurs, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques des voies de signalisation.
MAPKAPK-2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mapkapk2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mapkapk2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mapkapk2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mapkapk2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.