Plásmido Doble Nickase (h) MAP-2: sc-400282-NIC

MAP2 codifica la proteína asociada a microtúbulos 2 (MAP-2), un regulador del citoesqueleto enriquecido en neuronas que estabiliza y agrupa los microtúbulos en las dendritas para favorecer el crecimiento de neuritas, la arborización dendrítica y la estructura sináptica. MAP-2 vincula la dinámica de los microtúbulos con el transporte intracelular y la remodelación dependiente de la actividad, integrando vías de señalización que coordinan la polarización y la plasticidad neuronal. Las alteraciones en la organización o la expresión de MAP-2 se utilizan ampliamente como indicador de diferenciación neuronal e integridad dendrítica, y la desregulación de MAP2 se ha asociado con fenotipos relevantes para enfermedades del neurodesarrollo y neuropsiquiátricas en modelos experimentales. Como marcador dendrítico canónico, MAP-2 se emplea con frecuencia para estudiar cambios en la arquitectura del citoesqueleto en condiciones de estrés, inflamación y alteraciones de la proteostasis que afectan la conectividad neuronal.

MAP-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAP2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.