MAP-1S Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406495

Descripción general

MAP1S codifica la proteína 1S asociada a microtúbulos (MAP-1S), un adaptador del citoesqueleto que conecta los microtúbulos con la maquinaria de autofagia e influye en el tráfico intracelular, la dinámica de los orgánulos y las respuestas celulares al estrés. MAP-1S se ha implicado en la regulación de la formación de autofagosomas y del manejo de la carga, vinculando la estabilidad de los microtúbulos con la proteostasis y el control de calidad mitocondrial. A través de estos procesos, MAP1S contribuye a respuestas homeostáticas frente al estrés oxidativo y a perturbaciones metabólicas, vías que con frecuencia se encuentran alteradas en el cáncer y la neurodegeneración. La alteración de la expresión o la función de MAP1S se ha asociado con una autofagia desregulada y con fenotipos de inestabilidad genómica relevantes para la biología tumoral y otras patologías relacionadas con el estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MAP-1S (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MAP1S en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MAP1S junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MAP1S tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MAP-1S.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MAP1S para la investigación de la señalización de MAP-1S, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MAP1S críticos para la función de MAP-1S
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MAP1S para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MAP-1S CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MAP-1S CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MAP1S. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MAP-1S (h) y el plásmido HDR MAP-1S (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MAP1S para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MAP1S definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.