MAO-A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-401030

Übersicht

Das humane Gen **MAOA** kodiert die Monoaminoxidase A (MAO-A) der äußeren Mitochondrienmembran, ein flavinabhängiges Enzym, das die oxidative Desaminierung biogener Amine wie Serotonin, Noradrenalin und Dopamin katalysiert. Durch die Regulation des Monoaminabbaus beeinflusst MAO-A die Homöostase von Neurotransmittern, das mitochondriale Redoxgleichgewicht sowie nachgeschaltete Signalnetzwerke, die mit zellulären Stressantworten verknüpft sind. Die MAO-A-Aktivität trägt zu Signalwegen bei, die die Bildung reaktiver Sauerstoffspezies und den Aldehydstoffwechsel betreffen, und verbindet damit den Monoaminumsatz mit oxidativem Stress und metabolischer Anpassung. Eine veränderte **MAOA**-Expression oder -Funktion wurde mit neuropsychiatrischen Phänotypen und Erkrankungen mit dysregulierter monoaminerger Signalübertragung in Zusammenhang gebracht, was MAOA zu einem relevanten Ziel für mechanistische Studien in neuronalen und peripheren Zellsystemen macht.

Das MAO-A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MAOA-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MAOA-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MAOA nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die MAO-A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MAOA-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der MAO-A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MAOA-Exone abzielen, die für die MAO-A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MAOA-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom MAO-A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom MAO-A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MAOA-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das MAO-A HDR-Plasmid (h) und MAO-A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MAOA-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MAOA-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.